Peter Parker/蜘蛛侠

饰：托比·马奎尔

玛丽·简·沃森

饰：克尔斯滕·邓斯特

小绿魔

饰：詹姆斯·弗兰科

沙人

饰：托马斯·哈登·丘奇

格温·斯黛西

饰：布莱丝·达拉斯·霍华德

毒液

饰：托弗·戈瑞斯

Captain George Stacy

Ben Parker

Lab Technician

Dr. Curt Connors

Betty Brant

John Jameson

May Parker

Joseph'Robbie' Robertson

Mrs. Marko

J. Jonah Jameson

Philip Watson

Daily Bugle Photographer

Assistant

Research Scientist

Nurse

Hoffman

Chief State Trooper

Bugle Employee

Jazz Club Waitress